Gran parte de quienes enseñan enfermería, son enfermeras de profesión, no son profesoras quienes transitan desde la asistencia a la enseñanza universitaria, en donde se convierten en profesoras noveles. El saber que utilizan los profesores experimentados en el proceso de enseñanza, que les permite representar y formular el cuerpo de conocimientos de una materia, de manera que resulte comprensible para los estudiantes es denominado Conocimiento Didáctico del Contenido (CDC). El objetivo general es: Comprender la forma en que se genera y se operacionaliza el conocimiento didáctico del contenido en profesores noveles de enfermería con amplia trayectoria profesional. La metodología es un estudio cualitativo fundamentado en la epistemología del CDC, en donde utilizo el método de estudio de casos. Las participantes fueron 2 profesores noveles de enfermería de Universidades Chilenas. Como estrategias de recogida de información se realizaron observaciones no participantes de las actividades docentes virtuales, entrevistas en profundidad de tipo biográfica, y de análisis de práctica docente. El análisis de los datos se realizó con el método de comparaciones constantes. Los resultados se agrupan en tres dominios cualitativos expresados en un proceso vivenciado: Iniciando en la docencia universitaria: fragmentando mis concepciones; Elaborando mi conocimiento pedagógico: en camino hacia una práctica reflexiva; Transformando el saber práctico: reconociéndome como docente. El trabajo concluye que el CDC en las profesoras noveles suele ser ejercido de forma intuitiva, y que, por poseer una amplia trayectoria profesional en la asistencia, pudieron elaborar a través de la reflexión, su propio CDC, lo que no dejaba de lado, el hecho de que al iniciarse en la docencia sufrían las mismas tensiones de todo profesor debutante, usando pautas para su acción docente, además de las preocupaciones y juicio de su propio desempeño.